保持手術間“相對密閉狀態(tài)”，保證空氣的潔凈度：應保持層流手術室物品相對固定，盡量減少工作人員進出次數(shù)。常規(guī)用的手術耗材、液體、藥品等均在層流手術室的玻璃墻柜中分類放齊、放全，位置相對固定，保持基數(shù)；把與手術相關的各種儀器如電刀、顯微鏡、腹腔鏡等固定在手術間，各類物品分類、分規(guī)格擺放，標識清楚，使物各有位、過目知數(shù)、一目了然。 每天專人負責檢查及添置室內物品并登記；手術人員及參觀者進入手術室后，盡量減少走動，各項動作要輕柔，勿在手術室抖動各種敷料。手術過程中保持前后門關閉，以避免頻繁開關時空氣流動污染；盡量避免一位巡回護士同時巡回多臺手術，保證手術間處于相對封閉狀態(tài)。
強化清潔管理，減少各種污染的機會：層流手術室的一切清潔工作必須采用濕拭打掃，在凈化空調系統(tǒng)運行中進行。每天早晨濕拭并用消毒液擦拭手術室的物品，濕拭拖地并用消毒液擦洗墻面。層流手術室地面保持整潔，術中如有血液、體液濺到儀器或地面，及時用浸濕消毒液的抹布擦拭；手術間設有尖銳物收集箱、感染類垃圾收集袋及非感染性垃圾收集袋，術中產生的垃圾分類放置，術后集中處理，每臺手術結束后器械護士將污染敷料置于污物車內，由工人從污物通道運出，減少對地面的污染，減少污物在室間停留時間；每次手術完畢用消毒液擦拭手術間的無影燈、器械臺、手術床、床墊和體位墊及其他物品表面，并用消毒液濕拭清潔地面。每周進行徹底的清潔工作，不同級別的層流手術室使用各自專用的拖把以防止交叉感染，并用500 mg/L的含氯消毒劑浸泡消毒。每星期清洗初效過濾網1次，出風口1次，并用消毒液擦拭回風口過濾網。中效、高效過濾網每2年更換1次。 塑膠地板定期請清潔公司用專業(yè)單圓機清洗加打蠟。每月對潔凈手術室內空氣潔凈度和物體表面進行細菌監(jiān)測。
加強出入口的管理：在層流手術室大門及無菌區(qū)入口處鋪設易清洗且可用消毒液浸泡的地墊，每日更換，這將對進出的推車及其車輪起到除塵和消毒作用。設立交換廳，嚴格區(qū)分室內車、室外車，病人由病人通道入室，進出必須更換交換車。每日增加交換區(qū)清潔地面的次數(shù)。
